Ezio mulai merencanakan masa depan keluarganya. Ia berencana untuk pergi ke vila pamannya di luar kota, lalu pergi menjauh dari kota kelahirannya ini dan sekali lagi tinggal dengan damai.

Tapi membunuh Messer Uberto ialah prioritas utamanya sekarang. Ia takkan bisa hidup dengan tenang sambil mengetahui musuh keluarganya masih bernafas di dunia ini. Ia pun mulai malaksanakan rencananya untuk membunuh Messer Uberto, dimulai dengan mengintainya di tengah hari. Apakah ia bisa membunuh musuhnya dan mendapatkan kehidupan yang damai lagi?

Setelah Messer Uberto mengkhianati keluarga Ezio dan mengakibatkan ayah, kakak dan adkik laki-lakinya dihukum gantung, ia bersumpah akan membunuhnya dengan tangannya sendiri.

Untungnya adik perempuan dan ibunya selamat dan dilindungi oleh kakak pembantunya, seorang mucikari di sisi kota. Ia lalu mulai diajari oleh kakak pembantunya untuk latihan bagaimana membaur dalam keramaian. Ia juga mendapatkan senjata, senuah pisau tersembunyi yang diperbaiki oleh teman keluarganya, Leonardo da Vinci yang ia dapatkan bersamaan dengan jubah assassin dah sebuah naskah codex. Apakah itu cukup untuk membalaskan dendam keluarganya?

Kehidupan damai Ezio telah rusak. Keluarganya dituduh melakukan pemberontakan dan dijebloskan ke penjara. Rumahnya pun dirusak oleh prajurit.

Ia lalu menyelinap ke penjara dan menemui ayahnya untuk mengetahui alasan dibalik semua ini. Ayahnya lalu menyuruhnya untuk kembali kerumah dan membuka ruang rahasia dan mengambil semua isi peti rahasia. Di dalamnya ada jubah Assassin dan juga ada surat dokumen berisi bukti bahwa tuduhan itu ialah bohong. Ezio diminta menyerahkan surat dokumen itu ke temannya, Messer Uberto. Ezio kemudian mulai perjalanan membersihkan nama keluarganya